GlucanPhosphatasen sind essentiell für den normalen Stärkeabbau in Pflanzen und GlykogenStoffwechsel bei Säugetieren. ArabidopsisThaliana Phosphoglucan PhosphatasenStärkeüberschuss 4 (sex4) ist einer der fundamentalen Vertreter einer typischen dualen SpezifitätPhosphatasen (dsps).

Carrillo et al.(doi: 10.1016 / j.ab.2016.11.005) berichten über zwei In-Gel-Assays für GlucanPhosphatase-Nachweis. und sex4 wurde als Modell ausgewählt, welches E. coli alkalisch istPhosphatase (ap) wurde als Kontrolle verwendet. eine Methode zum Nachweis der Aktivität verwendetpnpp und der zweite gilt bcip / nbt. Zum einen waren die hergestellten Geleentweder mit Coomassie-Blau gefärbt oder unter Verwendung von Phosphatase-Aktivität entwickeltpnpp oder die Kopula bcip / nbt. zwei getestete Phosphatasen zeigten eine einzige, klare,leicht sichtbare chromogene Bande, die mit dem Coomassie-Blau zusammenfälltFärbung.

die EmpfindlichkeitVon beiden Methoden wurde verglichen, indem die Menge der geladenen Enzyme erhöht wurdedie nativen Gele. Bei beiden Methoden fanden sie, dass die Bandenintensität direkt istproportional zur mu des sex4-Enzyms in jeder Spur geladen. das ExperimentelleDie Ergebnisse zeigten, dass der pnpp-Phosphatase-Assay bis zu 0,34 nachweisen kannmu der sex4-Aktivität auf den Gelen. und bcip / nbt-Phosphatase-Assay ist möglichdetektieren bis zu 0,86 mu der sex4-Aktivität.

die Arbeit vonCarrillo et al. zeigten, dass pnpp und bcip / nbt sehr gute Substrate sindzur Visualisierung von Glucan-Phosphatase-Aktivitätsenzymen nach nativen Seitengelenda sex4 Enzym wurde leicht erkannt. und der Vergleich zwischen pnpp undbcip / nbt zeigte, dass pnpp ein besseres Substrat zum Nachweis von Glucan sein würdePhosphatasen. und sie spekulieren, dass zwei hier berichteten Assays sein könntenextrapoliert, um andere Glucanphosphatasen zu testen.

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