CHAPS ist eine organische Verbindung mit der Molekularformel C ₃₂ H ₅₈ N ₂ O ₇ S und einem Molekulargewicht von 614.877. CHAPS ist eine Art zwitterionisches Detergens, das häufig im Proteinreinigungsprozess verwendet wird. CHAPS kann auch in der biochemischen Forschung verwendet werden, um Zellen zu denaturieren und zu spalten, RNA und DNA zu extrahieren; Darüber hinaus kann CHAPS auch zur Herstellung einer Pufferlösung verwendet werden. Das Patent CN106478786A offenbart ein Verfahren zum Extrahieren eines wirksamen intrazellulären Proteins eines Entschwefelungsbakteriums. CHAPS wird in dem Patent als amphoteres Tensid verwendet. Die spezifischen Schritte des Schemas sind wie folgt:

(1)  Entschwefelungsbakterien-Aktivierungskultur, flüssige Fermentationskultur, Fermentationsbrühe nehmen, zentrifugieren, Überstand entfernen und das untere Sediment sammeln;

(2)  Nehmen Sie den Niederschlag in der mittleren und unteren Schicht von Schritt (1), fügen Sie 1 bis 2 ml/g Cracklösung hinzu (Die Crackflüssigkeit ist die wässrige Lösung aus Harnstoff, amphoterem Tensid und reduzierendem Schutzmittel, in der das amphotere Tensid enthalten ist ist CHAPS), rühre es magnetisch bei 0~4 ℃ und lege es für 8~10 Stunden in -18~-22 ℃ .

(3)  Die gefrorene Substanz in Schritt (2) wird mit Ultraschall bei 0~4 ℃ gebrochen und dann erneut bei -18~-22 ℃ für 8~10 Stunden aufbewahrt;

(4)  Die gefrorene Substanz in Schritt (2) wird mit Ultraschall bei 0~4 ℃ gebrochen und dann wieder bei -18~-22 ℃ für 8~10 Stunden aufbewahrt;

(5)  Nimm die überstehende Proteinlösung, die durch Zentrifugation in Schritt (4) erhalten wurde, füge die organische gemischte Lösung hinzu, mische und schüttle vollständig und zentrifugiere;

(6) Nach dem Zentrifugieren der Mischung in Schritt (5) den Überstand entfernen, organisches Lösungsmittel zugeben, vollständig mischen und schütteln und die Mischung zentrifugieren;

(7)  Wiederholen Sie den Arbeitsschritt (6) 2–4 Mal, entfernen Sie den Überstand von der zentrifugierten Mischung, gefriertrocknen Sie ihn mit einem Gefriertrockner, versiegeln Sie ihn und lagern Sie ihn bei 0–4 ° C .

Dieses Patent verwirklicht die Abtrennung und Reinigung von wirksamem intrazellulärem Protein des Entschwefelungsbakteriums durch Zentrifugation von Fermentationsbrühe, Zellfragmentierung, Proteinextraktion und -reinigung. Es ist eine einfach zu bedienende, kostengünstige, sichere und zuverlässige Extraktionsmethode.

Referenz

CN106478786A Ein Verfahren zum Extrahieren von wirksamem Protein aus Entschwefelungsbakterien.