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Wirkungen von Tris- und Bicin-Puffern auf die in vitro-Eigenschaften von Ulmen

2017-08-29


Uricase ist ein wichtiges Enzym im Purin-Stoffwechselweg des Organismus, der den Sauerstoff und die Harnsäure katalysieren kann, um Gicht und Hyperurikämie zu vermeiden, die durch übermäßige Ansammlung von Harnsäure im Blut verursacht wird. Urease-Liposomen (ulps) überwinden die Mängel anderer Uricase-Präparate durch Verpackungsmedikamente in der Lipiddoppelschicht mit guter Stabilität und hoher Sicherheit und haben eine gewisse Funktion des Targeting und der verzögerten Freisetzung [1,2]. aber im Vorbereitungsprozess wird seine Leistung durch das Puffersystem beeinflusst. tris-hcl und bicine -naoh sind die beiden am häufigsten verwendeten Puffer, und dieses Papier wird ihre Auswirkungen auf die in vitro Eigenschaften von Ulmen zusammenfassen.


tris-hcl und bicine-naoh
\u0026 emsp;

tris-hcl ist ein Puffersystem, das üblicherweise in biochemischen Experimenten verwendet wird und weithin als Lösungsmittel für Nukleinsäuren und Proteine ​​verwendet wird. es hat den Vorteil der kleinen Einmischung in den biochemischen Prozess. bicine-naoh gehört zum puffersystem des guten. es beteiligt sich nicht an und stört das biochemische Reaktionsprozess und kann gegen chemische und enzymatische Effekte resistent sein. daher werden sie oft in Zell-, Protein- und anderen biochemischen Experimenten eingesetzt.


Vorbereitung von Uricase-Liposomen


Das Umkehrverdampfungsverfahren ist ein sehr geeignetes Herstellungsverfahren zum Einkapseln wasserlöslicher Makromoleküle. das Herstellungsverfahren hat eine hohe Verkapselungsrate, eine gute Teilchengröße und eine gute Stabilität, und das Herstellungsverfahren ist einfach [3]. ein gewisser Anteil an Lecithin und Cholesterol wurden in einen Rundkolben gegeben, dann eine gewisse Menge Chloroform zugegeben, das Chloroform unter vermindertem Druck im Rotationsverdampfer entfernt, um einen gleichmäßigen Film zu bilden. der Äther wurde redispergiert, dann a tris-hcl Puffer (Ph = 8,5), der 2 mg Uricase enthielt, wurde der Lösung zugesetzt. Eisbad-Ultraschall zur Bildung eines einheitlichen Emulsionsdispersionssystems, reduzierte Druckdestillation zum Gelkollaps, wurde die einheitliche milchig-weiße Milchflüssigkeit gebildet. Tris-hcl-Puffer wurde zugegeben und durch ein 0,22 \u0026 mgr; m-Filter filtriert, um eine Ulmprobeprobe herzustellen. die gleiche Methode wurde verwendet, um ulps Proben mit zu erhalten bicine-naoh als Puffer.


Vergleich der in vitro Eigenschaften von Uricase-Liposomen


Kapselungseffizienz: Die Kapselungseffizienz von Liposomen wurde durch Gel-Säulen-Methode bestimmt. es wurde festgestellt, dass die Einkapselungsrate von Liposomen, die unter Verwendung von Bicin-Naoh-Puffer hergestellt wurden, höher war als die von Tris-hcl-Puffer;
Aktivität: Die Aktivität von Uricase-Liposomen wurde in Borsäure-Borax-Puffer bei 75 gmol / l gemessen, und die Uricase-Aktivität von Bicin-Naoh-Puffer wurde höher als die, die durch Tris-Hcl-Puffer hergestellt wurde;

Stabilität: Urease-Liposomen wurden in einer dunklen Dichtung bei 4 ° C gelagert und die Aktivität der Uricase in der Probe wurde zu einem gegebenen Zeitpunkt entfernt. Es wurde festgestellt, dass die Lagerstabilität von mit Bicin-Naoh-Puffer hergestellten Uricase-Liposomen stabiler war.


Zusammenfassend, bicine-naoh Puffer war überlegen tris-hcl Puffer bei der Herstellung von Uricase-Liposomen, die die Kapselungseffizienz von Ulmen und die Aktivität und Stabilität der Urikase in vitro verbesserten. dass es auch eine bessere Behandlung in der klinischen Verwaltung.


referenzen


[1] zhou yunli, er dan, zhang mi, et al. biochemische Eigenschaften von Uricase in uricase-haltigen Nano-Liposomen, die mit Bicin-Naoh-Puffer hergestellt wurden. huaxi pharmazeutische Zeitschrift, 2015, 30: 543-546.
[2] chongqing medizinische universität Harnsäure-Lipid-Nanopartikel und deren Herstellungsmethode. cn101816630a, 2010.

[3] zhang mi Effekte von Puffertypen auf Urease-Liposomen. Masterarbeit, chongqing medizinische Universität, 2014.


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