Disulfidbindung (-s-s-Bindung) ist eine Art kovalente Bindung zwischen s-Atomen. Es spielt eine wichtige Rolle bei der Bildung der dreidimensionalen Struktur von Proteinmolekülen. Um die primäre Struktur des Proteins zu identifizieren, muss die Disulfidbindung zuerst geöffnet werden. d tt und tcep-hcl werden häufig für die verwendet Reduktion der Disulfidbindung Was ist dann der Unterschied zwischen ihnen?

4-dithiothreitol (dtt)

dtt ist eine Verbindung, in der c-1 und c-4 Hydroxylgruppen von Threitol mit Sulfhydrylgruppen substituiert sind. es wird häufig bei der Reduktion der Disulfidbindung im Protein verwendet und kann die Bildung von intramolekularen oder intermolekularen Disulfidbindungen von Cystein verhindern.

dtt hat zwei Sulfhydryl-Gruppen, seine Funktion kann für 3 ~ 7 Tage dauern, und die Volatilität ist nicht stark. Jedoch können Disulfidbindungen, die in die Proteinstruktur eingebettet sind (Lösemittel-Unzugänglichkeit), oft nicht durch dtt reduziert werden. im Gegenteil, nach der Reduktionsrate kann der Einbettungsgrad der Disulfidbindung beurteilt werden. darüber hinaus kann ni um dtt reduziert werden. so in der Reinigung von Protein mit \"seinem\" mit ni Spalte markiert, die Verwendung von dtt sollte vermieden werden.

Tris (2-carboxyethyl) phosphinhydrochlorid ( tcep-hcl )

tcep-hcl ist der beste in der dreiwertige Phosphorderivate . Es ist eine farblose und geschmacklose reduktive Substanz, die in Wasser leicht löslich ist. es hat eine hohe Stabilität in Luft und wässriger Lösung und wird von Temperatur und Konzentration leicht beeinflusst. tcep ist ein partielles Reduktionsmittel, das wenig Nebenreaktion mit anderen Aminosäuren außer Cystein aufweist und in sauren Bedingungen (sogar ph = 3) eingesetzt werden kann. tcep hat die Vorteile der hohen Löslichkeit, geringe Toxizität, gute Stabilität in saurer und alkalischer Lösung. Es hat eine stärkere Reduktionskapazität als dtt, und seine Funktion kann für 2 ~ 3 Wochen dauern. tcep wird als eine gute Alternative zu dtt erkannt.

dtt und tcep-hcl können gegenseitig ersetzt werden, aber mit verschiedenen Effekten. verglichen mit dtt, tcep hat eine stärkere Reduktionsfähigkeit, und es ist selektiver; tcep ist stabiler sowohl bei sauren als auch bei alkalischen Bedingungen; Es hat keine Ladung und hat keinen Einfluss auf Follow-up-Experiment. so ist es oft in der Forschung der Proteinchemie und der Proteomik bevorzugt.