Tris (hydroxymethyl) aminomethan(Tris) -Pufferlösung ist ein biologisches Reagens, bei dem es sich um eine Pufferlösung handelt, die üblicherweise in biologischen Präparaten und medizinischen Präparaten verwendet wird. es wird allgemein verwendet in: Gelelektrophoresepuffer, wie tae oder tbe; Zubereitung von Laemmli-Puffer; Laufpuffer vorbereiten und Puffer zusammen mit Glycin und Sds laden; Bindungspuffer und ein Elutionsmittel bei der Anionenaustauschchromatographie; Rna-hybridisierung und DNA-Spaltung. unten stellen wir ihnen die teilnehmer von puffern für rna-experimente mit tris vor.
(10 ×)
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Reagens |
Menge (für 1,0 ml) |
Endkonzentration(10 ×) |
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tris-hcl (1 m, ph 8,0) |
500 ul |
0,5 M |
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mgcl2 (1 m) |
150 ul |
0,15 M |
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Dithiothreitol (dtt) (0,5 m) |
66 ul |
33 mm |
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h2O |
284 ul |
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(2 ×)
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Reagens |
Menge (für 1.0ml) |
Endkonzentration (2 ×) |
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atp (100 mm) |
10 ul |
1 mm |
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tris-hcl (1 m, ph 8,0) |
200 ul |
200 mm |
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mgcl2 (1 m) |
20 ul |
20 mm |
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dtt (1 m) |
6,6 ul |
6,6 mm |
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dmso |
200 ul |
20% (v / v) |
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Glycerin (Reinst) |
300 ul |
30% (v / v) |
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h2O |
bis 1 ml |
- |
Trishcl (10 mm, ph 7,6)
edta (1 mm)
Natriumdodecylsulfat (SDS) (0,5%, G / V)
3. rna-Bindung
1 × Tris-gepufferte Salzlösung (tbs)
0,05% Tween 20
2 mm mgcl2 (rase-frei)
10 mm Tris (ph 7,5, rase-frei)
137 mm nacl (rasefrei)
3 mm kcl (rasefrei)
2 mm mgcl2 (rase-frei)
2% Rinderserumalbumin (bsa)
10 ug / ml ssdna
10 ug / ml hefetrnaKombinieren Sie alle Zutaten außer Ssdna und hefetrna.
4. Lysepuffer für Hefe-Rna
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Reagens |
Menge (für 100 ml) |
Endkonzentration |
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tris-hcl (1 m, ph 6,8) |
5 ml |
50 mm |
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nacl (1 m) |
10 ml |
100 mm |
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Edta (0,5 m, ph 8,0) |
2 ml |
10 mm |
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ddh2O |
bis 100 ml |
- |
5. rna-Glühpuffer (10x)
0,5 m NaCl
100 mm Dithiothreitol
100 mm mgcl2
100 mm Tris-hcl (pH 7,5)
6. Rna-Transkriptionspuffer
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Reagens |
zu addierender Betrag |
Endkonzentration |
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mgcl2 (1 m) |
300 μl |
30 mm |
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nacl (5 m) |
100 μl |
50 mm |
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Spermidin (1 m) |
100 μl |
10 mm |
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Tris-Hcl (1 m) (ph 7,9) |
2 ml |
200 mm |
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H2o, Nuklease-frei |
7,6 ml |
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7. Transkriptionspuffer für Rna-Polymerase (5 ×)
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Reagens |
Menge (für 10 ml) |
Endkonzentration |
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tris-hcl (1 m, ph 8,0) |
2 ml |
200 mm |
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mgcl2 (1 m) |
400 ul |
40 mm |
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nacl (5 m) |
0,5 ml |
250 mm |
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Spermidin (100 mm) |
1 ml |
10 mm |
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H2O |
6,1 ml |
- |
Bei der Verwendung von Tris ist zu beachten, dass der pH-Wert des Tris-Puffers stark durch Temperatur und Konzentration beeinflusst wird. Daher sollte die Umgebung während des Herstellungsprozesses berücksichtigt werden.
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