Rezepte von üblicherweise verwendetem Puffer mit Guanidinhydrochlorid
2019-04-15 17:55:54
wie wir alle wissen,Guanidinhydrochloridwird häufig als Zwischenprodukt in Arzneimitteln, Pestiziden, Farbstoffen und anderen organischen Verbindungen verwendet, es ist auch ein wichtiger Rohstoff für Sulfonamide und Folsäure; Es kann als starke Denaturierungsmittel bei der Extraktion von Gesamt-Rna aus Zellen verwendet werden. zur selben Zeit,Guanidinhydrochloridwird häufig in verschiedenen Puffern für biologische Experimente verwendet. Lassen Sie uns die folgenden Rezepte betrachten.
1Guanidinhydrochloridpuffer (Guhcl)
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6 m Guanidinhydrochlorid
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8 mm Imidazol
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50 mm nah2po4
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50 mm Tris
ph auf 8,0 einstellen. Bereiten Sie sich innerhalb weniger Tage nach dem Experiment vor und lagern Sie bei Raumtemperatur (20 - 25 ° C).
2. Denaturierungspuffer mit Guanidinhydrochlorid
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6 m Guanidinhydrochlorid
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5 mm dtt
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50 mm Tris-cl (pH 7,5)
Erwärmen Sie die Lösung auf 40 ° C, um das Guanidin-HCl zu lösen. Stellen Sie den pH-Wert ggf. auf 7,5 ein.
3. Hydroxylamin-Spaltpuffer
Endkonzentrationen: 2m Hydroxylaminhydrochlorid, 4,3m Guanidinhydrochlorid, 0,2m Kaliumcarbonat (ph 9,0)
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Hydroxylaminhydrochlorid (analer Grad)
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Guanidinhydrochlorid (6 m wässrig), vorgekühlt
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Kaliumcarbonat (1 m)
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Naoh (50% w / v)
Löse 3,5 g Hydroxylaminhydrochlorid in 12 ml vorgekühltem 6m wässrigen Guanidinhydrochlorid (Eisbad verwenden). füge langsam 2 ml 50% (Gew./Vol.) Naoh unter kräftigem Rühren (Magnetrührstab) hinzu, gefolgt von 5 ml 1m Kaliumcarbonat. Stellen Sie den pH-Wert mit 50% Naoh auf 9,0 ein und stellen Sie dann das Volumen mit 6 m Guanidinhydrochlorid auf 25 ml ein.
Es wird berichtet, dass der Einschluss von Guanidinhydrochlorid die Effizienz der Asn-Gly-Spaltung verbessert.
4. Solubilisierungspuffer
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8 m Guanidinhydrochlorid
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50 mm Tris-cl (pH 7,5)
or
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10 mm dtt (Dithiothreitol)
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8 m Guanidinhydrochlorid
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50 mm Tris-cl (ph 8,5)
5. Denaturierungspuffer für den Ellman-Test
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Guanidinhydrochlorid (6 m)
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na2hpo4 (0,1 m, ph 8,0)
6. Sek. Spaltenpuffer
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50 mm Natriumphosphat, enthaltend 150 mm NaCl (pH 7,0)
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Denaturierungspuffer mit Harnstoff
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Denaturierungspuffer mit Guanidinhydrochlorid
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Peptidelutionspuffer
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