In biochemischen Experimenten spielt Pufferlösung eine unentbehrliche Rolle, die dem Einfluss einer kleinen Menge starker Säure und Alkali widerstehen kann, den pH-Wert halten, der der physiologischen Umgebung am nächsten ist. Puffermittel Hepes - ein zwitterionisches organisch-chemisches Puffermittel mit einem effektiven Pufferbereich von 6,8 ~ 8,2, das in einer Vielzahl biochemischer Reaktionen eingesetzt werden kann. Es wird häufig bei der Forschung von Organellen und stark denaturierten ph-sensitiven Proteinen und Enzymen verwendet, ebenso wie bei biochemischen Diagnosekits, DNA / RNA-Extraktionskits und PCR-Diagnosekits.

dann, wie Hepes vorzubereiten und zu verwenden ( 4- (2-Hydroxyethyl) -1-piperazinethansulfonsäure )

Über die Vorbereitung von Hepes-Pufferlösung gibt es verschiedene Ansichten in separaten Dokumenten. abhängig von der Anwendung ist einer Hepes + Naoh und der andere ist Hepes + Salz. Die spezifischen Methoden sind wie folgt zusammengefasst:

(1) 1 m Hepes + NaOH, pH = 7,0 (500 ml)

119,15 g Hepes werden in 400 ml destilliertem Wasser gelöst, dann 0,5 ~ 1 m wässrige NaOH-Lösung zugegeben, um den pH-Wert einzustellen, dann auf 500 ml mit destilliertem Wasser verdünnt und bei 4 ° C gelagert.

(2) Hepes + Salz (500 ml)

hepes 6,5 g, nacl 8,0 g, na2hpo4 • 7h2o 0,198 g, den pH-Wert mit 0,5 m wässriger wässriger Lösung einstellen, auf 500 ml verdünnen.

Es gibt zwei Möglichkeiten, Hepes zu verwenden ( cas: 7365-45-9 ):

(1) entsprechend der erforderlichen Konzentration kann es direkt zu dem Kulturmedium gegeben werden und dann filtriert und sterilisiert werden: 2,38 g Hepes wurden zu jedem 1000 ml Kulturmedium zugegeben, der pH auf 7,2 mit 1n Naoh eingestellt, filtriert und sterilisiert. Die Konzentration von Hepes beträgt 10 mmol / l.

(2) Bereite 100x Stammlösung (1 mol / l) vor, nehme 99 ml Kulturmedium und 1 ml Stammlösung, die endgültige Anwendungskonzentration beträgt immer noch 10 mmol / l.

Hepes ( Modell Nr .: q0005 ) gehört zum guten Puffer und hat die Vorteile hoher Wasserlöslichkeit, Membranundurchlässigkeit, chemischer Beständigkeit und Enzymolysebeständigkeit und verbindet sich nicht mit Metallionen. aber es sollte beachtet werden, dass die Endkonzentration von Hepes 10 ~ 50 mmol / l ist. unter normalen Umständen, 20mmol / l Hepes könnte die Pufferwirkung erzielen, Forscher sollten die Lösung entsprechend der tatsächlichen Situation mit der kommerziellen Hepes vorbereiten.