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Mops und Hepes können als Gametenpuffer kombiniert werden 2019-04-15 17:56:08

mops3- (n-Morpholino) propansulfonsäureist ein wichtiger biologischer Puffer, der Pufferbereich liegt zwischen 6,5 und 7,9; Hepes, 4- (2-Hydroxyethyl) -1-piperazinethansulfonsäure, ist ebenfalls ein Wasserstoffionenpuffer, der eine gute Pufferkapazität im pH-Bereich von 6,8 bis 8,2 hat und einen konstanten pH-Wert für lange Zeit steuern kann. Sie sind beide weit verbreitet in biologischen und chemischen Experimenten. Wenn die beiden als Gametenpuffer fungieren, was sind die Vorteile?


die Bedeutung des Gametenpuffers

Gameten beziehen sich auf reife Zellen, die vom Fortpflanzungssystem produziert werden, wenn sich der Organismus sexuell fortpflanzt, als Keimzellen bezeichnet. Gameten werden in männliche und weibliche Gameten unterteilt. Die weiblichen Gameten von Tieren und Pflanzen werden gewöhnlich als Eizellen (Eizellen oder Eier) und männliche Gameten als Spermien bezeichnet. Der Gametenpuffer ist ein Puffer, der Antibiotika, basische Ionen und verschiedene energetische Substanzen enthält. Es wird zum Waschen von Eiern und Spermien außerhalb des Inkubators verwendet, um die ivf (In-vitro-Fertilisation) vorzubereiten. drastische schwankungen in der umwelt können die lebensfähigkeit von gameten erheblich beeinträchtigen, was verheerende auswirkungen auf die qualität und lebensfähigkeit des embryos haben kann. Der Erfolg nachfolgender Operationen in der ivf hängt davon ab, ob die Homöostase der Eizelle aufrechterhalten werden kann. Gametenpuffer erhalten den Stoffwechsel der Eizellen aufrecht, reduzieren die Auswirkungen von Stress auf die Gameten und bereiten damit die Befruchtung vor.


traditioneller Gametenpuffer
Derzeit werden in traditionellen Gametenpuffern häufig Mops, Hepes oder Natriumbicarbonat-Kohlendioxid-Pufferpaare verwendet. Obwohl Mops und Hepes im Bereich der assistierten Reproduktion weit verbreitet sind, werden die Auswirkungen der Temperatur auf die Pka-Werte beider häufig ignoriert, ebenso wie die Auswirkungen von Mops auf die Beleuchtung. Das potenzielle Risiko der Pufferung der Gameten- und Embryonenqualität veranlasste die Forscher daher, das derzeit für die klinische In-vitro-Fertilisation verwendete ph-Puffersystem zu überprüfen.

Daher wurde ein stabileres ph-Matching-Puffersystem sowie ein mit dem System hergestellter Gametenpuffer entwickelt. Der Gametenpuffer der vorliegenden Erfindung verringert die Wirkung von ph auf die Aktivität der Gameten, und die durch den Gametenpuffer gespülten Gameten haben eine stark verbesserte Blastozystenbildungsrate und eine einheitliche Morphologie im Spätembryotest.


neuer Gametenpuffer

Sowohl Mops als auch Hepes sind Zwitterionen auf der Basis von Aminosulfonsäuren, die als Ampholyte wirken und einen relativ stabilen pH-Gradienten bereitstellen. Die Erfinder haben festgestellt, dass die Kombination von Mops und Hepes den pH-Wert in einem engeren Bereich steuern kann und eine höhere Pufferkapazität als ein einzelnes Pufferpaar bei derselben Konzentration aufweist. Daher kann unter Verwendung des Mops- und Hepes-Puffersystems der Stresseffekt von Gameten reduziert und für nachfolgende ivf vorbereitet werden. Gleichzeitig verringert dieselbe Konzentration von Mops- und Hepes-Puffersystem die Zytotoxizität des Pufferpaares im Vergleich zu dem einzelnen Pufferpaar und ist für die Lebensfähigkeit der Gameten förderlicher.


Der konkrete Plan sieht wie folgt aus:

das Lösungsmittel ist Wasser, einschließlich Wischmops und Hepes-Puffersystemen; Es enthält auch Natrium-, Kalium-, Calcium-, Magnesiumionen sowie Glucose, Natriumpyruvat, Albumin und nichtessentielle Aminosäuren. in der bevorzugten Lösung:


  • Die obigen Gametenpufferkomponenten sind: 90,24 bis 110,18 mmol / l Natriumchlorid, 0,43 bis 0,52 mmol / l Magnesiumchlorid, 4,267 bis 5,013 mmol / l Kaliumchlorid, 0,1522 bis 0,2567 mmol / l Magnesiumsulfat, 0,13 bis 0,30 mmol / l. Calciumpantothenat, 0,3513 bis 0,3958 mmol / l Kaliumphosphat, 21,0 bis 21,6 mmol / l Calciumlactat, 8 bis 12 mmol / l Hepes, 8 bis 12 mmol / l Mops, 3,85 bis 4,30 mmol / l Natriumbicarbonat, 0,3129 bis 0,3501 mmol / l-Natriumpyruvat, 2,5-3 mmol / l Glucose, 0,95-16 mmol / l Alanylglutamin, 0,09-0,10 mmol / l 1-Taurin, 5-10 ug / ml Gentamicinsulfat, 5 mg / ml Humanserumalbumin und 0,5 bis 1,5 mmol / l nicht-essentielle menschliche Aminosäuren (Glycin, L-Alanin, L-Valin, L-Serin, L-Asparagin, L-Aspartat, L-Glutaminsäure).
  • der ph des Gametenpuffers ist 7,25 ~ 7,35.
  • Der osmotische Druck des gametophysischen Puffers beträgt 285 ~ 295 mosm / kg.
  • der Endotoxingehalt des Gametenpuffers beträgt & lt; 0,25 eu / ml.

Verglichen mit der herkömmlichen Gametenpufferflüssigkeit ist der Endotoxingehalt des Puffers niedriger, was die Toxizität für die Gameten während des Gebrauchs verringert. Der pH-Bereich ist schmaler und stabiler, und die Gameten können den stationären Zustand besser aufrechterhalten und die Vitalitätsaktivität der Gameten verringern, wenn sie verwendet werden. Die Embryomorphologie ist auch eine Sättigung, die die Bildung und Entwicklung von Embryonen begünstigt und sich somit auf die In-vitro-Fertilisation vorbereitet.


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