Acridine-ester (NSP-DMAE-NHS), gelbes Pulver, CAS-NR.: 194357-64-7 eine wichtige Chemilumineszenz-Reagenz mit hoher Quantenausbeute，milde Reaktionsbedingungen, gute Reproduzierbarkeit und hohe Chemilumineszenz-Effizienz 。 NSP-DMAE-NHS ist weit verbreitet in den Bereichen der anorganischen, organischen verbindungen, Umwelt-monitoring, biologischen und pharmazeutischen Analytik, etc. Darüber hinaus ist es auch weit verbreitet für sensible Erkennung und Diagnose von vielen Arten von Krankheiten.

In Bezug auf die In-vitro-Diagnostik, acridinium ester(NSP-DMAE-NHS) - verbindungen sind auch geeignet für die Beschriftung der DNA-Stränge, um Chemilumineszenz-DNA-Sonden. Dieser Artikel stellt eine Methode der NSP-DMAE-NHS beschriftet Nukleinsäuren.

Nuklein-Säure ist die wichtigste Substanz in allen biologischen Molekülen, allgemein gibt es in allen Tier-und Pflanzenzellen, Mikroorganismen, Nukleinsäure ist in zwei Kategorien unterteilt: deoxyribonucleic Säure (DNA) und Ribonukleinsäure (RNA). Moderne medizinische Forschungs-Ergebnisse zeigen, dass das auftreten von vielen Krankheiten, wie Krebs und genetische Krankheiten, ist in Bezug auf DNA-mutation, und viele Infektionskrankheiten werden durch Viren verursacht, Krankheitserreger oder Parasiten in der Umgebung. Daher ist die Analyse der virus-spezifischen DNA-Sequenz ist förderlich für die Kontrolle der Epidemie situation.

In der Nukleinsäure-Hybridisierung-Analyse, die Vorbereitung von hoch spezifische und sensitive-markierter Sonden ist der Schlüssel zum Erfolg der Nukleinsäure-Hybridisierung-Analyse. Acridine-ester(NSP-DMAE-NHS) Derivate werden direkt beschriftet, auf Nukleinsäure-Sonden ohne Katalysator und die Lumineszenz-Quantenausbeute ist nicht betroffen. Darüber hinaus kann unter bestimmten Bedingungen, die gekennzeichnet acridinium ester(NSP-DMAE-NHS) auf den ungebundenen single-stranded DNA hydrolytisch zerstört, und nur der Doppelstrang-NSP-DMAE-NHS gebildet durch die Hybridisierung produzieren können, Chemolumineszenz, die gesamte Hybridisierung Prozess kann überwacht werden, ohne isolation.

Diese Methode der Kennzeichnung von Nukleinsäuren mit acridinium ester(NSP-DMAE-NHS) umfasst die folgenden Schritte :

(1) der Schutz der 5 'th-terminal und die 3' das terminal eine DNA-Sonde;

(2) die Kennzeichnung acridinium ester: aktivieren 25mm NHS acridinium-ester lösen sich in DMSO, die Vorbereitung von 1M von einer HEPES-Puffer-Lösung (PH=8.0), die entsprechend der Bedingung, dass das molare Verhältnis von Nukleinsäure-Sonde für den NHS acridinium ester 1 bis 5, die Durchführung der Zugabe zu der HEPES-Puffer-Lösung und durchführen einer Reaktion bei 37 DEGC für 1h;

(3) die Durchführung der HPLC-Aufreinigung. Die Methode hat positive Effekte, die nach der gewöhnlichen Methode, ein acridinium ester bezeichnet werden kann an das 5' terminal der Nukleinsäure-Sonde.

Die Methode kreativ-Etiketten acridinium ester(NSP-DMAE-NHS) an beiden enden, und eine weitere Verbesserung der Empfindlichkeit der Erkennung.

Weiterführende links:NSP-DMAE-NHS

Referenz: Methode der NSP-DMAE-NHS beschriftet Nukleinsäure CN109852669A