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Mechanismus und Unterschied von Guanidinhydrochlorid und Harnstoff als Denaturierungsmittel 2018-03-30 10:04:41

Denaturierung ist die physikalische oder chemische Wirkung aufProteine, die zu seiner Struktur und Eigenschaft führen. die Veränderung undVerschlechterung der sekundären und tertiären Strukturen für das Protein zeigen seineDenaturierung. einige Reagenzien, wie z Guanidinhydrochlorid und Harnstoff, wirdProtein denaturieren lassen. Die Reagenzien sind als Denaturierungsmittel bekannt. im Folgenden,zwei Vergällungsmittel Guanidinhydrochlorid und Harnstoff werden diskutiert.


Erstens, der Mechanismus der Proteindenaturierung von GuanidinHydrochlorid und Harnstoff wurden veranschaulicht. Es gibt drei vorgeschlagene Mechanismenfür die obigen Vergällungsmittel. Die erste Aussage ist die gebrochene Wasserstoffbrückewelche die Proteinstruktur flexibel machen. der zweite ist das Denaturierungsmittelwelche den hydrophoben Effekt verschlechtern. der dritte ist das Denaturierungsmittelmachen hydrophobe Aminosäurereste löslicher.


in der Denaturierung des Proteins, der Konzentration undDie Löslichkeit dieser beiden Vergällungsmittel ist unterschiedlich. in der Raumtemperatur 3-4mol / l Guanidinhydrochloridlösungen können die Proteinveränderung von nativ machenZustand bis zum Mittelpunkt der Denaturierung. im Allgemeinen hohe Konzentrationwird die Denaturierung verbessern. etwa 6 mol / l Guanidin-hydrochlorid wird hergestelltProtein denaturieren vollständig. aufgrund der ionischen Natur des GuanidinsHydrochlorid ist seine Denaturierungsfähigkeit stärker als Harnstoff. zum Beispiel 8mol / l Harnstofflösungen können einige globuläre Proteine ​​nicht vollständig denaturieren,aber es ist nicht der Fall für Guanidinhydrochlorid, das in der resultieren kannvollständig denaturiertes Protein. zusätzlich ist die Löslichkeit für Harnstoff schlechter als für GuanidinHydrochlorid. Harnstoff zersetzt sich zu Cyanat und modifiziert die Aminogruppe vonrekombinantes Protein für längere Reaktionszeit oder bei hoher Temperatur. aber eshat einige Vorteile mit Nichtionisierung, Neutralität und niedrigen Kosten etc. GuanidinHydrochlorid kann schnell lösen und modifiziert das rekombinante Protein nicht.aber die Kosten sind höher als Harnstoff, leicht in saurem Zustand auszufällen, diekann nachfolgende Experimente stören.


Mit einem Wort, die beiden Denaturanten haben ihre eigenenVorteile und Nachteile. Forscher müssen ein geeignetes Denaturierungsmittel auswählennach dem geplanten Experiment.


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