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Guanidinhydrochlorid und Harnstoff, welches ist besser für Protein Denaturierung? 2018-06-22 09:59:44

Proteine ​​sind für komplexe biochemische Reaktionen verantwortlich und haben bei der Ausübung biologischer Funktionen eine spezifische dreidimensionale Struktur. In biochemischen Tests müssen Forscher oft die Denaturierung und Renaturierung von Proteinen untersuchen,Guanidinhydrochloridund Harnstoff sind die am häufigsten verwendeten Reagenzien, was ist der Unterschied zwischen diesen beiden Reagenzien? welches ist besser?


Es gibt zwei Mechanismen für die Denaturierung von Proteinen durch Guanidinhydrochlorid und Harnstoff:


(1) das denaturierte Protein verbindet sich bevorzugt mit Guanidinhydrochlorid und Harnstoff, um Komplexe zu bilden. Mit der Erhöhung der Denaturierungskonzentration verändert sich das Protein im natürlichen Zustand in einen Komplex, was zu einer vollständigen Denaturierung führt;

(2) die Solubilisierung von Guanidinhydrochlorid und Harnstoff für hydrophobe Aminosäurereste: Guanidinhydrochlorid und Harnstoff können Wasserstoffbrückenbindungen bilden, die in der wässrigen Lösung mit hoher Konzentration (4 ~ 8 mol / l) brechen können, um ein besseres Lösungsmittel für Nicht-Lösungsmittel zu werden - polare Reste, so dass die Löslichkeit von Proteinmolekülen innerhalb der hydrophoben Reste zunimmt und Degeneration auftritt.


Was sind die Unterschiede zwischen Guanidinhydrochlorid und Harnstoff?


  • Konzentration: Bei Raumtemperatur können 3 ~ 4 mol / l Guanidinhydrochlorid das globuläre Protein vom natürlichen Zustand bis zum Denaturierungszustand auf den Mittelpunkt bringen; etwa 6 mol / l Guanidinhydrochlorid können das Protein vollständig in den Degenerationszustand versetzen. während einige globuläre Proteine ​​selbst in 8 mol / l Harnstofflösung nicht vollständig denaturiert werden können.
  • Löslichkeit: Harnstoff löst sich langsam und schwach auf als Guanidinhydrochlorid. seine Löslichkeit beträgt 70% ~ 90%. die Löslichkeit von Guanidinhydrochlorid beträgt mehr als 95%.

im Allgemeinen, wie üblicherweise bei der Denaturierung von Proteinen verwendet, Guanidinhydrochlorid (50-01-1) hat eine relativ starke Lösungskapazität und denaturierte Fähigkeit und verursacht keine kovalente Modifikation des rekombinanten Proteins, hat jedoch die Nachteile von hohen Kosten, leichter Ausfällung unter sauren Bedingungen und Interferenz mit der Proteinionenaustauschchromatographie; die Löslichkeit von Harnstoff ist relativ schwach, hat jedoch die Vorteile von Nicht-Ionisierung, Neutralität, geringen Kosten und keine Proteinfällung nach Protein-Renaturierung.


bearbeitet vonSuzhou Yacoo Wissenschaft co., Ltd.


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