ecl, dab und nbt / bcip kolorimetrische Methoden werden sehr häufig in biochemischen Experimenten wie Immunhistochemie (ihc), Immunzytochemie (icc) und Western Blot (wb) verwendet.

Weißt du, was der Unterschied zwischen ihnen ist?

ecl - verstärkte Chemilumineszenz

ecl enthält im allgemeinen Luminol, H2O2, Leuchtverstärker und andere Substanzen. Luminol wird durch hrp und h2o2 oxidiert, um Fluoreszenz zu erzeugen, und dieser Prozess wird durch den Lumineszenzverstärker verstärkt.

Der Lumineszenzverstärker spielt eine Schlüsselrolle im System, der ideale Lumineszenzverstärker sollte (1) lichtempfindlich, (2) Lichtstabilität und (3) niedriger Hintergrund oder kein Hintergrund sein.

Dab - 3,3'-Diaminobenzidin

dab ist ein chromogenes Substrat für Peroxidasen, das in Gegenwart von h2o2 Elektronen verliert und Farbänderungen und Akkumulation zur Bildung eines gelbbraunen unlöslichen Produkts zeigt. die Reaktion ist wie folgt:

hrp + h ₂ O ₂ + Tupfen → hrp + h ₂ o + oxidierter Klecks ↓

Das Verfahren hat die Vorteile einer guten Spezifität, einer stabilen Leistung und eines bequemen Betriebs. es eignet sich für die Proteinhybridisierung und Immunchemie.

bcip-- 5-Brom-4-chlor-3-indolylphosphat

nbt / bcip ist eine der besten Substratkombinationen für alkalische Phosphatase (ap). Unter der Katalyse von ap wird bcip hydrolysiert, um ein starkes reaktives Produkt zu erzeugen, das mit nbt reagiert, um unlösliche dunkelblaue bis blauviolette Chemikalien zu bilden. das kit kann zur enzymatischen färbung von ihc- und wb-experimenten in alkalischen phosphatase-systemen eingesetzt werden.

Tabelle 1. entsprechendes Enzym und Reaktion von ecl, nbt / bcip und dab