Pufferlösung wird in biochemischen Experimenten verwendet, um den pH-Wert des Systems zu stabilisieren. mops,3- (n-Morpholino) propansulfonsäure, mes, 2-Morpholinoethansulfonsäure, werden üblicherweise in biologischen Experimenten verwendet und spielten eine sehr wichtige Rolle. Was ist der Unterschied zwischen den zwei Puffern? Wie bereite ich die Pufferlösung vor?
Mops (cas 1132-61-2), 3- (n-Morpholino) propansulfonsäure
der Pufferbereich von Mops ist 6,5 ~ 7,9. es kann benutzt werden:
(1) als Laufpuffer bei der Elektrophorese und zur Proteinreinigung in der Chromatographie;
(2) als Lysepuffer für Escherichia coli-Zellen;
(3) als Puffer für die Isolierung und Transfektion von Rna im Northern Blot;
(4) in Agarmedium für die Kultur von Bakterien, Hefe und Säugetierzellen;
(5) als Elutionsmittel in der Gelfiltrationschromatographie;
(6) für Bicinchoninsäure (bca) -Assay;
(7) zur Untersuchung des Elektronentransports und der Phosphorylierung der Chloroplastenprobenpräparation.
Herstellungsverfahren für 10 × Mops Puffer ist wie folgt:
(1) 41,8 g Mops werden in etwa 700 ml destilliertem Wasser gelöst;
(2) eingestellt auf 7,0 mit 2n Naoh;
(3) 20 ml 1 mM NaOAc und 0,5 mM EDTA (pH 8,0), behandelt mit depc, wurden zu der Lösung gegeben;
(4) das Volumen auf 1 l einstellen, dann mit 0,45 μm Filtermembran filtrieren, um Verunreinigungen zu entfernen, bei Raumtemperatur lagern und vor Licht schützen.
Messpuffer, 2-Morpholinethansulfonsäure
der Pufferbereich ist 5,5 ~ 6,7, pka Wert von Mes Puffer ist in der Nähe von physiologischen ph, es wird in den folgenden Experimenten verwendet:
(1) hochtoxisches Cacodylat und Ionenpuffercitrat und -malat ersetzen;
(2) gepufferte Medien für Bakterien-, Hefe- und Säugetierzellen. hohe Konzentrationen von Mes sind für die meisten Pflanzen toxisch, können aber in Pflanzenmedien in Konzentrationen von ~ 10 mm verwendet werden;
(3) Studium von Tau-Protein;
(4) Elektrophorese und Chromatographie, einschließlich Kapillarelektrochromatographie, Gelfiltrationschromatographie, Phosphocellulosesäulenchromatographie, hydrophobe Interaktionschromatographie, Kationenaustauschchromatographie und SDS-Seite;
(5) Komplex mit Organozinn (iv) -Molekülen als Antitumormittel.
Vorbereitungsmethode ist wie folgt:
Angenommen, der ph ist 6 und die Konzentration ist 100mm:
(1) 0,1 mol oder 19,5 g Mes wurde gewogen und in 500 ml destilliertem Wasser gelöst;
(2) der pH-Wert wurde mit 1n oder 10n NaOH-Lösung auf 6,0 eingestellt;
(3) das Volumen auf 1 l einstellen und bei 4ºC aufbewahren.
die Wahl des Puffers richtet sich nicht nur nach dem erforderlichen Pufferbereich und der Kapazität der Pufferlösung, sondern auch nach dem spezifischen experimentellen Gehalt. Darüber hinaus sollte der Experimentator auf die Sterilisation von Behältern, Wasser und anderen Zusatzstoffen achten.
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