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ein ph-stabilisiertes Lymphozytenmedium mit Hepes 2019-05-24 09:24:32


genetisch bedingte Krankheit bezeichnet eine Krankheit, die durch eine Veränderung des genetischen Materials verursacht oder durch ein krankheitsverursachendes Gen kontrolliert wird. Derzeit wird bei der Diagnose genetisch bedingter Krankheiten hauptsächlich die Methode der Zytogenetik angewendet, nämlich die Karyotypanalyse, die für die Diagnose und das Screening genetisch bedingter Krankheiten von großer Bedeutung ist. Der Schlüssel zur Karyotypisierung liegt in der Kultivierung qualifizierter Lymphozyten. Das traditionelle Lymphozyten-Kulturmedium verwendet ein Natriumbicarbonat-Puffersystem, das leicht durch Kohlendioxid in der Umwelt beeinflusst wird. bei längerer lagerung erhöht sich der ph-wert, was der erhaltung des mediums nicht förderlich ist. Um die oben genannten technischen Probleme zu überwinden, verwendeten die Forscher 4-Hydroxyethylpiperazinethansulfonsäure (Hepes), um ein stabileres pH-Medium zu entwickeln.


Der spezifische Plan lautet wie folgt:

Das Lymphozytenmedium besteht aus 1640-Basalmedium, Phytohämagglutinin (pha, 100 mg / l), Kälberserum (20 Vol .-%) und Natriumglycerophosphat / Hepes-Doppelpuffersystem (5 ~ 50 mm). Das Natriumglycerophosphat / Hepes-Doppelpuffersystem besteht aus Phosphatpuffer (na2hpo4 und kh2po4), Natriumglycerophosphat und Hepe. Die spezifischen Komponenten und Konzentrationen sind in der folgenden Tabelle 1 aufgeführt.


Tabelle 1. Liste der Bestandteile und Konzentrationen der Lymphozytenmedien.

Komponente

Konzentration

Grundmedium

1640 mittel

pha

100 mg / l

Natriumglycerophosphat

3 g / l

Hepes

3 g / l

n / a 2 hpo 4

2 g / l

kh 2 po 4

1 g / l

Kalbserum

20%


Nehmen Sie die Komponenten des obigen Mediums und geben Sie sie in das hochreine Wasser, so dass die Komponenten vollständig aufgelöst sind. Das Volumen mit hochreinem Wasser auffüllen, filtrieren und sterilisieren.


Das Lymphozyten-Kulturmedium verwendet ein Natriumglycerophosphat / Hepes-Puffersystem, hat keinen Einfluss auf die nachfolgende Kultur der Zellen und kann den pH-Wert der Zellen stabilisieren. Das Puffersystem wird durch das Kohlendioxid in der Umwelt und die verbleibenden Gaskomponenten nicht beeinträchtigt und trägt zur langfristigen Aufbewahrung des Mediums bei.


Verweise

[1] lymphozytenkulturmedium mit stabilem ph und herstellungsverfahren und anwendung davon. cn104988120b, 18.12.2018.


bearbeitet von suzhou yacoo science co., ltd.
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