banner
Anwendung von Tris (77-86-1) bei der Pflanzenproteinextraktion

2017-08-07

Proteomik ist es, den Mechanismus der Lebenstätigkeiten und den molekularen Mechanismus des Krankheitsauftretens von der Ebene des Proteoms weiter zu verstehen, und in der Forschung der Proteomik ist die Proteinextraktion einer der grundlegendsten und kritischsten Aspekte. Tris ist ein gemeinsames Mittel in dem Experiment der Pflanzenproteinextraktion, die Verfahren schließen Tris-hcl, Tris-phenol, Tris-Aceton-Phenol ein. Diese Methoden werden in diesem Artikel zusammengefasst.


Tris-hcl


Die Wirkung von Tris-hcl auf die Extraktion von Protein war besser als die von tca-Aceton. Tca-Aceton-Extraktion von Protein ist in der Region mit kleinem Molekulargewicht uneben, Proteinflecken sind nicht klar, horizontale Streifen und vertikale Streifen sind relativ schwerwiegend, während tris-hcl die oben genannten Mängel überwindet und das saure Protein, das sich schwer durch tca trennt, trennt -Aceton-Methode. Zusätzlich zur Trennung von moderaterem Molekulargewichts-Protein konnte Tris-hcl auch eine Menge von hochmolekularen und niedermolekularen Proteinen erhalten.


Tris-hcl-Methode hat die Vorteile der kurzen Extraktionszeit, moderate Kosten, einfache Extraktionsstufe, weniger Proteinverlust und reproduzierbares experimentelles Ergebnis.



Tris-phenol


Tris-Phenol verwenden die Eigenschaften von tris-gesättigtem Phenol: Phenol ist ein gutes Lösungsmittel für Protein, Protein und Lipide werden bei der Herstellung der Probe in Phenolen gelöst, während Salz, Nukleinsäure, Polyphenole und Polysaccharide und andere lösliche Substanzen vorliegen Die Wasserphase; Durch die Erhöhung der Zentrifugalkraft und der Zentrifugationszeit ist es möglich, die Dichte des Zuckers so weit wie möglich der oberen Schicht des Überstandes zu überlassen; Protein in Phenolphase durch die Methanollösung von Ammoniumacetat ausfallen und dann das Protein mehrmals mit kaltem Aceton reinigen, Pigmente und Ammoniumionen und andere Verunreinigungen können entfernt werden.


Diese Methode ist sehr effektiv bei der Handhabung von Pflanzenproben mit einer großen Menge an störenden Substanzen, aber es ist relativ komplex und zeitaufwendig.


Tris-aceton-phenol


Die Kombination von tca-Aceton und Tris-Phenol zur Extraktion von Protein, hat die Vorteile von tca-Aceton-Präzipitation und Tris-Phenol. Die restliche tca wird zuerst mit einer Methanollösung, die Ammoniumacetat enthält, gewaschen und die Ph der Lösung auf über 7,0 eingestellt, und ein Gemisch aus Phenol und sds wird verwendet, um das Protein aufzulösen. Phenol-sds kombinierte Extraktion ist effektiver als Phenol, Sds Puffer Extraktion allein. Tris-Aceton-Phenol-Methode hat sehr gute Ergebnisse bei der Protein-Extraktion von vielen Pflanzen erreicht, und der Hintergrund und Streifen in elektrophoretischen Muster sind sehr klar, kann es weit verbreitet in Pflanzenblättern und Früchte Protein-Extraktion verwendet werden.


Die Extraktionsmethode ist sehr zeitsparend, die gesamte Extraktionszeit ist etwa 1h, deutlich weniger als die der traditionellen Methode.


Für die Extraktion von pflanzlichen Protein ist die Probe vielfältig, und jede Pflanze enthält verschiedene Komponenten, und es gibt viele interfere Faktoren, so dass keine Methode auf eine Vielzahl von Proben angewendet werden kann. In dem Experiment muss der Zweck (um ein Zielprotein oder das gesamte Protein zu erhalten) zuerst gelöscht werden, und dann das Extraktionsverfahren entsprechend den Merkmalen der Probe auswählen.

Bearbeitet von suzhou yacoo science co., Ltd.

Copyright © Suzhou Yacoo Science Co., Ltd. Alle Rechte vorbehalten

Onlineservice

service

Onlineservice

kontaktiere uns jetzt